Introducción: El aceite esencial de Dysphania ambrosioides (L.) Mosyakin & Clemants (syn. Chenopodium ambrosioides L) ha mostrado una actividad antileishmanial promisoria en diferentes estudios preclínicos. Su principio activo fue identificado como el ascaridol (ASC), un endoperóxido natural reconocido por sus propiedades antihelmínticas. Objetivos: En este trabajo, presentamos la evaluación in vitro del ASC sobre Leishmania spp., su efecto en el modelo in vivo de leishmaniasis cutánea y su posible mecanismo de acción. Métodos: Se estudió la actividad antileishmanial del ASC en modelos in vitro e in vivo. Posteriormente, se analizó la formación de radicales libres, su actividad en presencia de agentes quelantes, así como su reactividad. Resultados: El ASC inhibió el crecimiento in vitro de L. tarentolae, L. amazonensis y L. infantum. En ratones BALB/c infectados con L. amazonensis y tratados con el ASC a 30 mg/kg por vía intralesional, fue capaz de reducir el tamaño de la lesión y la carga parasitaria. Finalmente, se demostró la formación de un radical libre centrado en el carbono, una disminución de su actividad in vitro en presencia de agentes quelantes y fue reactivo en el modelo de xylenol naranja. Conclusiones. Este trabajo demostró las potencialidades del ASC sobre Leishmania, para lo cual es vital la presencia del grupo endoperóxido en su estructura. Estos resultados pueden promover futuras investigaciones relacionados con un fitomedicamento basado en el ASC.